Alextina  |  Dec 28,2024

艾迪基因的蛋白质表达纯化平台采用自主开发的纯化工艺,专为Cas酶产品实现高纯度、高活性、高回收率表达纯化,本公司的Cas酶经活性测试,其灵敏度和活性明显高于国际一流公司和其他市面上的酶,并且检测限可以达到amol级别。目前蛋白质表达纯化平台已制得LBCas12a、AapCas12b、LwaCas13a、LbuCas13a四种针对CRISPR检测相关的高品质核酸酶产品,可用于基于CRISPR系统的基因检测相关产品研发。

LbCas12a属于V型CRISPR-Cas系统,在靶标DNA存在PAM的情况下,由RNA介导特异性靶向切割双链DNA的核酸酶。相比Cas9,Cas12a只需要单个crRNA,且体积更小,更易被递送进细胞;同时,LbCas12a-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA的结合释放出强大的非特异性ssDNA反式切割活性,可以用于基因检测和成像。

AapCas12b,又名C2c1,纯化自含有Alicyclobacillus acidophilus Cas12b 表达基因的E.coli菌株,属于V型CRISPR-Cas系统,在靶标DNA存在PAM的情况下,由RNA介导特异性靶向切割双链DNA的核酸酶。LbCas12b-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA的结合释放出强大的非特异性ssDNA反式切割活性,相比Cas13a,Cas12b可以在环介导等温扩增(LAMP)反应条件下能维持更高的活性。

LwaCas13a纯化自含有Leptotrichia wadei CRISPR-Cas13a (C2c2) 表达基因的E.coli菌株。LwaCas13a属于VI型CRISPR-Cas系统,是由RNA介导靶向切割RNA的核酸酶。LwaCas13a具有较高的特异性和敏感性,可以用于检测单个RNA分子。

LbuCas13a纯化自含有Leptotrichia buccalis CRISPR-Cas13a 表达基因的E.coli菌株。LbuCas13a属于VI型CRISPR-Cas系统,是由RNA介导靶向切割RNA的核酸酶。LbuCas13a具有较高的特异性和敏感性,可以用于检测单个RNA分子。

 

一步法蛋白质纯化

一步法蛋白质纯化是指通过单一的分离步骤直接从混合物中提取和纯化目标蛋白质,而不需要进行多次分离和纯化步骤,一步法蛋白质纯化通常使用亲和层析技术。

亲和层析是一种基于生物分子间特异性相互作用来分离和纯化生物分子的技术,利用目标蛋白质与其特定配体之间的亲和性,将目标蛋白质从混合物中分离出来。在亲和层析中,可以在所需分离的蛋白上结合一个标签,此标签能与层析介质上的配体结合,从而使带有标签的目的蛋白留在介质上,其他杂质蛋白不能结合或仅能微弱结合而从层析介质上流过。吸附在介质上的目的蛋白使用适当的缓冲溶液即可洗脱,从而得到纯化的目的产物。

一步法蛋白质纯化流程

 

相关业务

●   Cas酶产品现货:全新推出的Cas酶现货库,涵盖Cas12aCas12b和两种Cas13a产品,无论是进行双链DNA、单链DNA还是RNA检测,我们的产品都能满足您的需求。

为什么选择艾迪基因的蛋白质纯化平台

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